（一）静脉采血法

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

实验准备

15

1．器材：一次性消毒注射器、压脉带、枕垫、消毒棉签、试管。

10

2.试剂：30g/L碘酊、75%乙醇。注：遗漏一种扣1分，扣完为止。

5

操作过程

85

1.准备抗凝管（血常规检测用EDTA-K2）。

5

2.选择注射器、检查采血针的气密性，将针头斜面对准针筒刻度，将空气排空。

10

3.选择静脉：患者取坐位，前臂水平伸直置于桌面枕垫上，暴露穿刺部位，选择容易固定、明显可见的肘前静脉。

5

4.消毒：先以碘酊自穿刺处从内向外，顺时针消毒皮肤，待碘酊挥发后，再以75%酒精棉签以同样方式擦去碘迹，待干。注：若未到位，则扣5分。

10

5.扎压脉带：在采血部位上方扎压脉带（注意勿污染已消毒部位），并嘱患者握紧拳头，使静脉明显充盈。注：若污染已消毒部位，则扣5分。

5

6.穿刺：打开一次性采血针或注射器包装，左手拇指固定住穿刺部位下端，右手持采血针或注射器（针头斜面和针筒刻度朝上），沿静脉走向使针头与皮肤呈30°角快速刺入皮肤。然后呈5°角向前穿破静脉壁进入静脉腔。见回血后，将针头顺势探入少许。并立即解开压脉带。注：穿刺手法不正确扣15分。失败则扣30分。

30

7.抽血：

注射器：左手固定针孔，缓慢抽至所需血量，（采血针：将负压采血管连接至采血针另一端，）用消毒干棉球压住针孔，请患者松拳，迅速拔出注射器。嘱患者按压针孔数分钟，防止出血。

10

8.放血与混匀：取下注射器针头，将血液沿试管壁缓慢注入抗凝管。轻轻混匀。

10

总分

100

100

（二）毛细血管采血法

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1．器材：一次性消毒采血针、试管、微量吸管、无菌干棉球、酒精棉球、

10

2.试剂：生理盐水

5

操作过程

85

1.准备：1支小试管，加入2ml生理盐水。

5

2.按摩：轻轻按摩无名指指尖内侧，使局部组织自然充血。

10

3.消毒：用75%乙醇棉球擦拭采血部位皮肤，待干。

10

4.针刺：用左手拇指和示指固定采血部位使其皮肤和皮下组织紧绷，右手持一次性消毒采血针自指尖腹内侧迅速刺入，深度2-3mm，立即出针。

10

5.拭血：待血液自然流出后，用无菌干棉球擦去第一滴血。

10

6.吸血：血液自然流出时，用微量吸管吸血至10ul刻度，然后用无菌干棉球压住伤口止血。

30

7.稀释：用无菌干棉球擦净微量吸管外部后，将吸管深入生理盐水底部慢慢排出，并用上清液冲洗馆内余血2-3次，混匀。

10

总分

100

100

红细胞计数

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：试管、微量吸管、显微镜、改良牛鲍计数板、玻璃管；

5

2.试剂：红细胞稀释液。

5

3.标本：外周血或抗凝血。

5

操作过程

85

1.加稀释液：取小试管一支，加入红细胞稀释液2ml。

10

2.加血：用微量吸管吸取10ul末梢血或抗凝血，擦去管外余血，轻轻加至稀释液底部，再轻吸上清液清洗2-3次，立即混匀。

20

3.充池：先混匀，用微量吸管吸取红细胞悬液冲入计数池，室温静置3-5min。

20

4.计数：按用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞总数N。（数上不数下，数左不数右。）

30

5.计算：红细胞/L=N*25/5*10*10⁶*200

5

总分

100

100

白细胞计数

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管

5

2.试剂：白细胞稀释液。

5

3.标本：新鲜全血或末梢血。

5

操作过程

85

1.加稀释液：用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。

10

2加血：用微量吸管吸取20ul新鲜全血或末梢血。擦去管外余血，轻轻加入白细胞稀释液底部，再吸取上清液清洗2-3次。将试管中血液与稀释液混匀，使其完全变为棕褐色。

20

3.充池：再次混匀，用微量吸管吸取白细胞悬液冲入计数板中，室温静置2—3分钟。

20

4.计数：在低倍镜下计数四角的四个大方格内的白细胞总数N。

30

5.计算：白细胞=N/4*10*20*10⁶

5

总分

100

100

瑞氏染色法

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：载玻片、推片、吸耳球、显微镜、毛细吸管。

5

2.试剂：瑞氏染色液（I号原液和II号磷酸盐缓冲液）、吉姆萨染液或瑞-吉复合染液。

5

3.标本：末梢血或EDTA抗凝血。

5

操作过程

85

1.采血：用毛细吸管吸取1滴抗凝血于距载玻片一端1cm处，或直接用洁净玻片沾取1滴末梢血。

10

2.推片：左手平执载玻片，右手持推片从后方或前方接近血滴，使血液沿推片边缘展开成适当的宽度，立即将推片与载玻片呈30-45°角，轻压推片边缘，将血液推展成厚薄适宜的血涂片。涂片头、体、尾三部分分明。

25

3.干燥：在空气中晃动推好的血涂片，使其迅速干燥。

5

4.标记：在载玻片一端用记号笔编号。

5

5.染色：待血涂片干透后，用蜡笔在两端划线。然后平置玻片于染色架，滴加染液3-5滴，使其迅速盖满血涂片，约0.5-1min，滴加等量或稍多的缓冲液，用吸耳球对准血涂片吹气，使染液充分混匀。

30

6.冲洗：5-10min后用流水冲去染液，待干。

5

7.观察结果：将干燥后的血涂片置显微镜低倍镜下观察。

5

总分

100

100

白细胞分类计数

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：显微镜、香柏油、擦镜纸、清洁液。

5

2.试剂：瑞氏染液、磷酸盐缓冲液（Ph6.4-6.8）。

5

3.标本：制备良好的血涂片。

5

操作过程

85

1.瑞氏染色：将血涂片用瑞氏染色法染色，冲洗干净，自然干燥后备用。

30

2.低倍镜观察：低倍镜下观察白细胞的分布和染色情况。

10

3.油镜观察：选择体、尾交界处，细胞分布均匀、染色良好的区域，按一定的方向顺序，对所见到的每一个白细胞进行分类，并做好记录，共计100个白细胞。

40

4．计算：求出各类细胞所占的百分率。

5

总分

100

100

血小板计数

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

前期准备

15

1.器材：显微镜、改良牛鲍计数板、微量吸管、试管。

5

2.试剂：10g/L草酸铵稀释液

5

3.标本：新鲜静脉血或末梢血。

5

操作过程

85

1.加稀释液：加10g/L草酸铵稀释液0.38ml于小试管中。

10

2.加血：吸取20ul抗凝全血或新鲜末梢血于草酸铵稀释液中，混匀。

10

3.稀释、静置：待完全溶血后，再混匀1min，置室温10min。

10

4.充池：用微量吸管取1滴血小板悬液充入计数板，静置10-15min。

10

5.计数：用高倍镜计数中央大方格的四角和中央共5个中方格内血小板的数量。

40

6.计算：毎升血小板数=5个中方格内血小板数*10⁹/L

5

总分

100

100

血红蛋白测定（HiCN测定法）

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：微量吸管、试管、移液管、分光光度计、试管

5

2.试剂：HiCN转化液、HiCN标准液200g/L商品试剂。

5

3.标本：新鲜外周血或末梢血。

5

操作过程

85

1.加转化液：试管内加5mlHiCN转化液。

10

2.加血与转化：加20ul全血到转化液底部，用上清液反复清洗3次，充分混合，静置5min。

5

3.测定：分光光度计以HiCN转化液或者蒸馏水调零，测定吸光度A。

10

4.计算：血红蛋白（g/L）=A*64458/44000*251

5

总分

100

100

脑脊液常规检验

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：试管、微量吸管、显微镜、改良牛鲍计数板。

5

2.试剂：生理盐水、冰乙酸、瑞氏染色液、饱和苯酚溶液。

5

3.标本：新鲜脑脊液

5

操作过程

85

1.理学检查：观察颜色、透明度、凝固性。

15

2.显微镜检查

1）细胞总数计数：直接用微量吸管吸取混匀的脑脊液充入计数板的上下2个计数池，静置3min，计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞总数N。计算：N*10⁶/L

15

2)有核细胞计数：在小试管内加入冰乙酸1-2滴，转动试管，使其内壁粘附少许冰乙酸后倾去，滴加混匀的脑脊液4滴，混匀，静置3min。充池，计数（同细胞总数计数方法）。

15

3）有核细胞分类计数：转高倍镜，计数100个白细胞，根据细胞形态和核形态分别计数单个核细胞、多个核细胞的数量，计算各占百分比。必要时进行瑞氏染色后在油镜下进行分类计数。

15

3.蛋白定性试验（潘迪试验、Pandy Test）：小试管中加入2ml饱和苯酚溶液，垂直滴加2滴脑脊液标本，在黑暗背景下立即肉眼观察结果。

25

总分

100

100

浆膜腔积液常规检验

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：试管、微量吸管、显微镜、改良牛鲍计数板。

5

2.试剂：生理盐水、冰乙酸、瑞氏染色液、饱和苯酚溶液。

5

3.标本：浆膜腔穿刺液。

5

操作过程

85

1.理学检查：观察颜色、透明度、凝固性、比密。

15

2.显微镜检查

1）细胞总数计数：直接用微量吸管吸取混匀的脑脊液充入计数板的上下2个计数池，静置3min，计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞总数N。计算：N*10⁶/L

15

2)有核细胞计数：在小试管内加入冰乙酸1-2滴，转动试管，使其内壁粘附少许冰乙酸后倾去，滴加混匀的脑脊液4滴，混匀，静置3min。充池，计数（同细胞总数计数方法）。

15

3）有核细胞分类计数：转高倍镜，计数100个白细胞，根据细胞形态和核形态分别计数单个核细胞、多个核细胞的数量，计算各占百分比。必要时进行瑞氏染色后在油镜下进行分类计数。

15

3.粘蛋白定性试验（李凡他试验、Rivata Test）：100ml量筒中加入2滴冰乙酸，再加约100ml蒸馏水，混匀，垂直滴加1滴待测标本，在黑暗背景下立即肉眼观察结果。

25

总分

100

100

（一）ABO血型鉴定（正定型法）

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：试管、滴管、记号笔、显微镜、离心机。

5

2.试剂：标准抗A、抗B血清，生理盐水。

5

3.标本：新鲜静脉血。

5

操作过程

85

1.制备5%被检红细胞生理盐水悬液：将抗凝血离心或红细胞自然沉降后取下层红细胞2滴于小试管，加入生理盐水2ml，将红细胞与生理盐水混匀，2500r/min离心3min，弃去上清液，重复洗涤3次后，自管底吸取1滴压积红细胞加入19滴生理盐水中，此即为15%的红细胞生理盐水悬液。

20

2.标记试管：取两支小试管，用记号笔分别标记抗A、抗B.

5

3.加标准抗血清：分别加抗A、抗B标准血清各一滴于相应试管中。

5

4.加入红细胞悬液：分别加入被检者5%红细胞生理盐水悬液1滴于各试管中，混匀，立即以1000r/min离心1min。

10

5.观察结果：先观察上层有无溶血现象，再斜持试管轻轻弹动，使管底的红细胞慢慢浮起，肉眼观察有无凝集；再用低倍镜观察凝集程度强弱，如轻微凝集或不见凝集，必须将反应物倒于玻片上，再以低倍镜观察。

25

6.判断结果。

20

总分

100

100

(二) ABO血型鉴定（反定型法）

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：试管、滴管、记号笔、显微镜、离心机。

5

2.试剂：5%A、B、O型标准红细胞生理盐水悬液。

5

3.标本：新鲜静脉血。

5

操作过程

85

1.分离血清：以2500r/min离心3min待检血液，分离血清。

5

2.标记并加被检者血清：取小试管3支，分别标记A、B、O字样，各加入被检者血清1滴。

5

3.加标准红细胞：按标记分别各加入5%标准红细胞悬液1滴，混匀，立即以1000r/min离心1min

10

4.观察结果：先观察上层有无溶血现象，再斜持试管轻轻弹动，肉眼观察有无凝集；再用低倍镜观察。

30

5.判断结果。

35

总分

100

100

交叉配血（盐水介质法）

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：试管、滴管、记号笔、显微镜、离心机。

5

2.试剂：生理盐水

5

3.标本：患者和献血员的静脉血。

5

操作过程

85

1.     患者准备：1）分离其血清，标记为PS；

       2）配制5%患者红细胞生理盐水悬液，标记为PC。

15

2.献血员准备：1）分离其血清，标记为DS；

2）配制5%献血员红细胞生理盐水悬液，标记为DC。

15

3.交叉配血：取两支小试管，分别标明主、次；在主侧配血管中加入PS和DC各一滴，在次侧配血管中加入DS和PC各一滴，混匀，1000r/min离心1min。

15

4.观察结果：先观察上层有无溶血现象，再斜持试管轻轻弹动，观察管底反应物有无凝集，必要时用低倍镜观察。

15

5.判断结果。

25

总分

100

100

革兰染色法

项目

分值

内容及评分标准

满分

得分

术前准备

15

1.器材：载玻片、接种环、记号笔。

5

2.试剂：革兰氏染液、生理盐水。

5

3.标本：待检标本。

5

操作过程

85

1.涂片：取洁净载玻片一张，用记号笔画一个直径1.5cm左右的圆圈，用灭菌接种环挑2环无菌生理盐水于载玻片上，再挑取少许培养物于盐水中磨匀，

10

2.干燥：室温干燥，或将标本面朝上，在酒精灯火焰上方半尺高处慢慢烘干。

5

3.固定：将已干涂片在火焰中通过3次。

5

4.初染：将结晶紫染液加于制好的涂片上，染色1min，细流水冲洗，甩去积水。

15

5.媒染：加卢戈碘液作用1min，细流水冲洗，甩去积水。

15

6脱色：加95%酒精数滴，摇动玻片数秒，使褪色均匀；然后斜持玻片，再滴加酒精，直到流下的酒精无色为止。用细流水冲洗，甩去积水。

15

7.复染：加稀释石碳酸复红染30-60s，用细流水冲洗，甩去积水。

15

8.镜检：待标本自干，或用吸水纸吸干后，用油镜观察。

5

总分

100

100